|
|
如何挑選合適的elisa試劑盒■ 背景 Elisa生物試驗是一種敏感性高，特異性強，重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩定、易保存，操作簡便，結果判斷較客觀等因素，已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中。ELISA檢測試劑盒適用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎（HEV）病毒 IgM 抗體ELISA檢測。 如何挑選合適的elisa試劑盒？ 1、查找待測樣本的蛋白濃度 可以通過NCBI的文獻，給出的蛋白表達量參考值來比較elisa試劑盒給出的樣本值與報道值是否一致。 2、試劑盒的應用種屬、檢測樣本的種類 除試劑盒特別說明外，一般不同種屬不能通用。常見待測樣本種類有：血清和血漿（不同抗凝劑），細胞上清，和細胞裂解液，試劑盒中不同樣本的稀釋液不混用。 3、?.檢測范圍： ?建立線性范圍：需測定9-11個濃度水平，每個濃度水平重復測定3-4次。 ?驗證標稱線性參數：需測定4-6個濃度水平，每個濃度水平重復測定3-4次。 ?所有樣本應在一次運行中或幾次間隔很短的運行中隨機測定，最好在一天之內完成。 4、試劑盒的其它指標 a. 靈敏度： ?示例：人IL-13的最低可檢測濃度為0.1 pg/ml(6 次獨立實驗的平均值)。10 個零標準品濃度 OD 的平均值加上兩倍SD，計算最低可檢測濃度。 ?注意：靈敏度跟檢測范圍最低點不相等。 b.?穩定性（重復性、精密性） ?酶標板內精密度3 個已知濃度的樣本酶標板內重復測定 20 次，評估酶標 板內的精密度。酶標板間精密度 3 個已知濃度的樣本酶標板間重復檢測 6 次，評估酶標板間的精密度。 ?試劑盒一般板內變異系數小于10% ，板間變異系數小于15% （統計學概念）
總結 ?對于elisa試劑盒來說，正確的處理樣本是保證檢測準確性和正確性的一步。正式實驗之前使用少量的樣本進行預實驗，可以選擇2、5、10倍稀釋樣本，選擇合適的稀釋比例進行實驗，這點非常重要！千萬不能圖省事，到時濃度太大超過檢測限值，數據測不出，不僅費時費力，還要心疼咱的科研經費。同時，樣本的保存也非常重要，保存不當或在冰箱里保存過久的樣本，血清中lgG可聚合成多聚體，導致結果偏高。建議五天內檢測的血清樣本可短暫存放4℃，一周之后測定的血清樣本應該低溫凍存，同時切忌反復凍融。如果是血清樣本，也要主要樣本不能有溶血、脂血和細菌等殘留，這些樣本中存在非特異性顯色影響結果。 九邦生物ELISA試劑盒  九邦生物是一家專業從事細胞生物學與免疫學相關的檢測試劑的研發、生產、銷售、服務的高技術企業，目前，已建立ELISA科研試劑盒、生化試劑盒、培養基、血清等生物科研用品的一站式服務平臺，公司同時提供相關配套實驗解決方案和檢測服務，自成立之初，泉州九邦生物科技有限公司就認識到產品質量是企業高速成長的生命線；為此，在每一類產品的生產過程中，逐步建立起有針對性的、標準嚴格的生產工藝與質控體系，確保產品的規?；a與質量穩定。同時，根據市場的需求，不斷地進行產品改進與新產品研發，緊跟現代生物學研究與應用的前進步伐！致力于每位客戶的滿意和成功，為客戶提供有競爭力的產品和解決方案，持續為客戶創造大價值是泉州九邦生物科技有限公司一貫秉承的信念。 |
